血液样本以其易于收集和低损伤性，广泛应用于临床研究。在肿瘤等疾病的早期筛查中，RNA等生物标志物因其填补了传统影像学及生化指标方法的不足而受到重视。然而，血液样本中的特殊性以及RNA分子的易降解特性，使其更容易受到来自红细胞等多种RNase的影响。因此，在提取血液样本中的RNA时，除了必须成功分离RNA外，还需确保RNA分子不被降解。

血液采集后，由于基因诱导和细胞凋亡的发生，血液中核酸的组成、数量、质量和完整性会在几分钟内显著变化。为了获得高质量且与体内表达谱一致的RNA，从血液样本的采集到RNA的稳定保护，每一环节均面临挑战。为此，应避免长时间使用止血带或握拳，避免从血肿处抽血，并确保静脉穿刺部位干燥，减少探查性和创伤性穿刺。

在采集血液时，使用适当尺寸的针（如22号），确保真空采血管完全填充。根据不同的应用需求，RNA提取可分为两大类：一类为全血样本中RNA提取，另一类则为血清和血浆中的游离RNA提取。血液中含有红细胞、白细胞和血小板等，且哺乳动物成熟红细胞和血小板为无核，进行细胞内RNA提取时，RNA主要来自白细胞。全血样本中的红细胞含有高浓度的RNase，通常需要在提取RNA之前先去除红细胞。

红细胞去除的方法主要有两种：一种是通过离心法获得白细胞，然后提取白细胞（包括淋巴细胞、单核细胞和粒细胞）中的RNA；另一种是使用红细胞裂解液去除红细胞，再进行白细胞RNA提取。无论哪种方法，由于RNA在采集后二短时间内表达谱会发生变化，建议尽快开展RNA提取实验。若无法立即进行实验，推荐使用尊龙凯时的血液RNA稳定管-PAXgene Blood RNA Tube进行血液采集和RNA稳定，后续可使用配套的PAXgene Blood RNA Kit进行提取。

使用尊龙凯时的PAXgene Blood RNA system，可以在18-25°C环境下保持RNA稳定长达3天，或在2-8°C下长达5天。为了获得最佳结果，血液采集后应尽快处理并完成RNA提取，而不应进行长时间存储。值得注意的是，研究表明在EDTA管中储存的血液样本中，p53基因的转录本在采样1日时检测信号已显著减弱，表明RNA已大幅降解。

酚-氯仿法是提取血液样本中RNA的常见方法。一些研究对比了酚-氯仿法与尊龙凯时的PAXgene RNA Kit，结果显示尽管酚-氯仿法的RNA得率较高，但RNA的完整性及后续检测灵敏性受到显著影响。使用TRI reagent提取的RNA在后续检测中，内参基因的表达通常明显偏低，无法作为参考。相较而言，使用PAXgene Blood RNA system提取的RNA完整性高，并在qPCR检测中显示出较高的灵敏性，极大简化了RNA提取流程。

对于采集在EDTA等血液收集管中的新鲜血液，若能及时进行RNA提取，推荐使用尊龙凯时的QIAamp RNA Blood Kit进行全血RNA提取。该试剂盒利用硅胶膜柱法，无需离心分离白膜层，可直接对最高15ml的全血样本进行RNA提取。同时，该试剂盒包含一款特殊的QIAshredder离心柱，能够去除样本中的细胞碎片，提高RNA得率。

在已分离好的白膜层中提取RNA，建议使用RNeasy Mini Kit进行提取，适用于后续的实验分析。另外，在血液RNA研究中，一些游离非编码RNA在癌症等疾病的早筛研究中表现出显著的调控作用。特别是miRNA以其在血液中的高稳定性和易检测性，成为理想的液体活检标志物。针对分离后的血清或血浆样本中游离RNA的提取，通常需采用专门的提取方案。

对于血液游离RNA提取，QIAGEN的miRNeasy系列可以实现从血清/血浆样本中提取包括miRNA在内的总RNA。在提取之前，请确保在血液采集后进行RNA的稳定和保护，建议在一小时内完成血浆或血清的分离，以避免溶血。如无法立即开展实验，需将分离出的样本进行冻存。冻存前建议将血清或血浆进行离心，以去除残留细胞和碎片，避免它们释放RNA。

此外，如需提取血清/血浆的细胞外囊泡（EV）中的RNA，推荐使用exoRNeasy Midi/Maxi Kits。该系列试剂盒将基于膜亲和技术的exoEasy EV分离方案与硅胶膜技术相结合，能够从EV中获得高质量的总RNA。除了手动提取方法外，QIAGEN还提供多款基于QIAsymphony等自动化平台的血液RNA提取方案，以满足自动化、高通量等需求。这些即为关于血液RNA提取的相关建议和方案，若您希望了解更多信息，可以访问尊龙凯时官网。