古典猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒使用指南

尊龙凯时的古典猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）用于古典猪瘟病毒的检测，包含50个检测样本的包装规格。此试剂盒可辅助临床诊断古典猪瘟病毒感染，但不作为确诊依据。

古典猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒使用指南 - 尊龙凯时品牌

本试剂盒专为古典猪瘟病毒设计了特异性引物和探针，针对病毒的高度保守区域进行荧光PCR反应。在含有古典猪瘟病毒基因组模板的条件下，PCR反应会产生荧光信号。通过荧光定量PCR仪进行实时数据监控，从而实现检测结果的定性分析。

试剂盒的组成包括：

注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。

应存放于避光条件下，温度保持在-20℃以下，避免反复冻融，试剂盒有效期为12个月。

适合于多种实时荧光定量PCR仪，如ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列等。

1. 血液或血清样品：需使用无菌注射液抽取样本，并置于离心管中待检。
2. 肺脏、淋巴结和脾脏样品：取样本20g，加入少量灭菌PBS，用无菌研磨器研磨成糊状，离心后取上清待检。
3. 避免样本间的交叉污染。
4. 样本收集后应立即检测，若不能，需冷藏保存，长期保存可冻存于-80℃以下。

从冰箱取出试剂盒，并充分融化与混匀试剂，瞬时离心去除管壁附着液体。核算需要的反应数目，并根据反应体系计算所需试剂量。准备时，充分混匀后瞬时离心。

使用QIAGEN或Roche公司的RNA提取试剂盒提取RNA，按照说明书操作。

在PCR反应样本管中加入处理好的待测标本RNA，各加入5μL，终体积为25μL，盖好PCR反应盖并混匀后转移至PCR仪器上。

将样本管置于实时荧光定量PCR仪相应位置，按要求设置核酸扩增参数进行PCR扩增。

1. 阳性对照应有典型的S型扩增曲线或Ct值≤35；阴性对照则Ct值应>38或无Ct值。
2. 阳性标本结果Ct值≤35或有明显指数增长期；可疑结果Ct值在35～38范围内应再重复测试。
3. 阴性结果Ct值>38或无Ct值。

FAM+表示检出猪蓝耳病病毒，FAM-则表示未检出。

1. 使用本试剂盒的实验室应遵循相关实验室管理规范。
2. 操作过程中应避免RNA降解，使用无核酶处理的器具耗材。
3. 各区域的物品应专用，定期消毒工作台及器具。
4. 确保所有试剂在使用前充分融化，并避免直接接触PCR管。
5. 不同批号试剂不宜混用，确保在有效期内使用。

尊龙凯时将继续致力于提供高品质的检测试剂盒，推动生物检测技术的发展，为公共卫生安全保驾护航。